DNA synthesis and nucleolar organizer regions circadian rhythm in mouse regenerating liver hepatocytes

DNA synthesis and Nucleolar Organizer Regions (NORs) were studied in C3HS inbred mice standardized for periodicity analysis. Immunohistochemical detection of Bromodeoxyuridine (BrdU) incorporated into DNA with a monoclonal antibody and silver staining of NORs (AgNORs) were assessed by means of a digital image analysis system in histological sections of regenerating liver. Tissue samples were obtained at different times after hepatectomy along a circadian span. The results showed a strong correlation of values between DNA synthesis (BrdU labelling index) and AgNOR numbers, with higher counts during the activity period of animals at 00:00/38 and 04:00/42 hours Time of Day/Hours Post-Hepatectomy (TD/HPH), being the differences with other time points highly significant. Our observations demonstrate the existence of a strong correlation of DNA synthesis measured by BrdU incorporation and AgNOR numbers with a defined circadian rhythm in mouse regenerating hepatocytes.

Accion del extracto de higado de ratones parcialmente hepatectomizados sobre la actividad mitotica de los enterocitos del raton joven / Action of liver extract from partially hepatectomized mice on the mitotic activity of young mouse enterocytes

En un trabajo anterior demonstramos que el plasma de retones adultos obtenido 36 horas post hepatectomía parcial, ejerce un efecto inhibitorio en la actividad mitótica de los enterocitos crípticos duodenales del ratón joven. En el presente trabajo se analiza la posibilidad de que dicho efecto se origine en algún factor del hígado regenerante. Para ello se estudia la acción del extracto de hígado de ratones adultos (90 días) obtenido 36 horas después de su hepatectomía parcial (70 por ciento), sobre la actividad mitótica de los enterocitos de ratones jóvenes, analizando 3 niveles celulares de las criptas duodenales. Se emplearon 36 ratones hembra de la cepa C3H/S de 27 días de edad la mitad de los cuales recibió, a las 16:00 horas, una inyección intraperitoneal de solución fisiológica, y restantes extracto hepático (0,01 ml/g). Lotes de 8 animales de cada grupo se sacrificaron a las 08:00/16, 12:00/20 y 16:00/24 (hora del día/horas post tratamiento) previa inyección de colchicina (2mug/g) 4 horas antes. Los resultados, expresados como metafases colchicínas por mil núcleos, demuenstran que la actividad mitótica, en los animales tratados con extracto, es significativamente menor con respecto a los testigos. El efecto inhibidor se manifesta en los niveles celulares de 1 a 4 y de 5 a 12 células de las criptas analizadas. En el nivel superior, de 13 a 20 células, no se aprecia ninguna modificación de la actividad proliferativa. Esta inhibición de la actividad mitótica de los enterocitos de las zonas basal y media de las criptas duodenales es probablemente debido a factores hepáticos difusibles.